Kök Hücre Kültürüyle Üretilen Otojen Fibroblastların, Dolgu Maddesi Olarak Kullanılan Çapraz Bağlı Hyaluronik Asidin Uzun Ömürlülüğü Üzerindeki Etkisi
Özet
Arka Plan: Çeşitli biyomalzemeler, plastik cerrahide yumuşak doku artırımı için kullanılmaktadır. Organik moleküller genellikle kısa sürede vücutta emilir. İnorganik moleküller ise vücutta daha uzun süre kalır, ancak çeşitli reaksiyonlara yol açma eğilimindedirler; bu nedenle hiçbir tanesi ideal dolgu maddesi değildir.
Amaçlar: Bu çalışma, kültürlü fibroblastların hyaluronik asit içinde dolgu malzemesi olarak enjeksiyonunun klinik ve histolojik etkilerini incelemek için tasarlanmıştır.
Yöntemler: 30 Sprague Dawley ratinin sırtlarından alınan deri biyopsileri çalışmada kullanılmıştır. Bu biyopsilerden elde edilen dermal fibroblastlar 21 gün süreyle kültürlenmiş ve sıçanların otojen etiketli kültürlü fibroblastları, hyaluronik asitle karıştırılarak intracutan olarak enjekte edilmiştir. Dördüncü ve sekizinci ayların sonunda, enjeksiyon bölgelerinden biyopsiler alınmış ve ışık ve elektron mikroskoplarıyla incelenmiştir.
Sonuçlar: Enjekte edilen fibroblastlar, elastin ve kolajen üretimi analiz edilmiş ve stabil, uzun ömürlü ve iyi tolere edildikleri bulunmuştur. Herhangi bir komplikasyon gözlemlenmemiştir.
Sonuçlar: Kültürlü insan dermal fibroblastları, hyaluronik asit ile birleştiğinde uygun, biyouyumlu ve uzun ömürlü bir malzeme sağlayabilir ve geçici dolgu etkilerinin ötesinde deri yenileme yöntemleri olarak kabul edilmelidir.
Yüzdeki kırışıklıklar ve deri kontur defektlerinin ortadan kaldırılması için, ticari olarak hazırlanmış malzemelerden oluşan enjekte edilebilir dolgu maddeleri şu anda yaygın olarak kullanılmaktadır. İdeal bir yumuşak doku dolgu maddesi, nonantijenik, noninflamatuar, enjeksiyon sonrası stabil, göç etmeyen, toksik olmayan, kanserojen olmayan, biyolojik inert, uzun ömürlü fakat emilebilen ve kolayca uygulanabilir olmalıdır.
Hyaluronik asit (HA), N-asetilglukozamin ve glukuronik asit gibi disakkarit tekrarı ile yapılmış son derece büyük bir polimerdir. HA, hücre göçü ve proliferasyonu gibi biyolojik hücre süreçlerinde rol oynar. Daha uzun süre etkili sonuçlar elde etmek amacıyla, stabilize edilmiş HA ve kültürlü fibroblastlar kombinasyonu oluşturulmuştur.
Yöntemler
Çalışmada 30 Sprague Dawley ratinden alınan deri biyopsileri kullanılmıştır. Dermal bağ dokuları kollajenaz B ve DNAaz çözeltisi ile işlenmiştir. Fibroblastlar 3 hafta boyunca kültürlenmiştir. Karışımdaki hücre yoğunluğu yaklaşık olarak 30 × 10⁶/mL idi. Kültür ortamı, yalnızca matriks, hücre içeren kültür ortamı ve hücreler ile matriks karışımı, her sıçanda dört farklı bölgeye intradermal olarak uygulanmıştır. Enjeksiyon bölgelerinden dördüncü ve sekizinci aylarda biyopsi örnekleri alınmıştır.
Sonuçlar
Histolojik olarak, yalnızca kültür ortamının enjekte edildiği 1. bölgede bir fark gözlemlenmemiştir. HA kütleleri, 2. ve 4. bölgelerde gözlemlenmiştir. 4. bölgedeki kollajen fibrillerinin çapları diğer bölgelere göre biraz daha inceydi.
Tablo 1. Enjeksiyon bölgelerindeki kollajen fibrillerinin kalınlığı
| Bölge No. | Kalınlık (μm) (Ortalama ± SD) |
|---|---|
| 1 (kültür ortamı) | 48.3 ± 4.4 |
| 2 (yalnızca hyalüronik asit) | 53.2 ± 5.2 |
| 3 (yalnızca fibroblast) | 50.1 ± 4.7 |
| 4 (hyalüronik asit ve fibroblast karışımı) | 45.3 ± 5.1 |
Dermis tabakasının ortalama kalınlığı 4. bölgede ve 0.25 mm² başına damar yapılarının dağılımı, diğer bölgelere kıyasla 2. ve 4. bölgelerde anlamlı şekilde artmıştır.
Tablo 2. 4 enjeksiyon bölgesinde dermis tabakasının ortalama kalınlığı
| Bölge No. | Kalınlık (μm) (Ortalama ± SD) |
|---|---|
| 1 (kültür ortamı) | 2.63 ± 0.21 |
| 2 (yalnızca hyalüronik asit) | 2.56 ± 0.51 |
| 3 (yalnızca fibroblast) | 2.61 ± 0.24 |
| 4 (hyalüronik asit ve fibroblast) | 3.23 ± 0.82 |
Tablo 3. Enjeksiyon bölgelerinde damar yapılarının sayısı (0.25 mm² başına)
| Bölge No. | Kalınlık (Ortalama ± SD) |
|---|---|
| 1 (kültür ortamı) | 24.0 ± 1.7 |
| 2 (yalnızca hyalüronik asit) | 32.2 ± 2.3 |
| 3 (yalnızca fibroblast) | 20.4 ± 1.4 |
| 4 (hyalüronik asit ve fibroblast) | 28.3 ± 2.6 |
Hiçbir grupta iltihaplanma veya granülasyon ile ilgili bulgular gözlemlenmemiştir.
Tartışma
Dolgu maddelerinin enjeksiyonu sanatı, 20. yüzyılın başlarında parafin enjeksiyonu ile başladı. 1980’lerin başında sığır kolajeni tanıtıldı ve kısa sürede altın standart haline geldi. Son yıllarda, HA türevleri enjekte edilebilir dolgu malzemeleri olarak kullanılmaktadır. Çalışmamızda, kültürlenen insan fibroblastları için biyodegradable polimer iskele olarak çapraz bağlı HA kullanıldı. Histolojik incelemede, 3. ve 4. bölgelerde kollajen fibrillerinin diğer bölgelere göre nispeten ince olması, kollajen sentezinin aktif olduğunu düşündürmektedir. 4. bölgede elaunin ve oksitalanların daha fazla olması, kültürlenen fibroblastların cilt yaşlanmasını önlemede bir rol oynadığını göstermektedir.
Sonuç
Bu çalışma, kültürlenen insan dermal fibroblastlarının HA ile birleşerek uygun, biyouyumlu ve uzun ömürlü bir materyal oluşturabileceğini ve dermal yenileme alanında, geçici dolgu etkisinin ötesinde yeni bir yöntem olarak kabul edilmesi gerektiğini göstermektedir.
Danışmanlık İçin Mr. Tunç Tiryaki ile İletişime Geçin
Uzun ömürlü dolgu maddeleri için gelişmiş teknikler ile ilgileniyor musunuz?
Mr. Tunç Tiryaki, çapraz bağlı hyalüronik asit ve kültürlenen otojen fibroblastlar kombinasyonu dahil olmak üzere yenilikçi dolgu tekniklerini tartışmak için uzman danışmanlık hizmetleri sunmaktadır.
